 |
Диагностика болезней свиней с использованием методов иммуноферментного анализа
Верховский О. А.
доктор биологических наук
|
 |
Непоклонова И. В.
кандидат ветеринарных наук |
НПО НАРВАК, Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского,
Городской научно-методический центр по диагностике и профилактике болезней человека и животных, г. Москва
 Теоретические и практические достижения современной науки значительно расширили арсенал методов диагностики инфекционных и инвазионных болезней свиней.
Несмотря на то, что традиционные иммунологические методы попрежнему широко используются в ветеринарной практике метод иммуноферментного анализа (ИФА) занял ведущее место при проведении рутинных исследований. Это обусловлено, во-первых, преимуществами ИФА как метода и, во-вторых, появлением на рынке коммерчески доступных диагностических ИФА-наборов. В настоящее время ИФА, как основной метод диагностики, широко применяется в ряде Национальных программ борьбы с инфекционными болезнями животных во многих странах Западной Европы и Америки.
ИФА, в основе которого лежит высокоспецифическое взаимодействие антител с антигенами, широко используется для развития и совершенствования двух основных направлений современной лабораторной диагностики. К ним относятся методы, направленные на выявление антигена и методы, направленные на определение антител (табл.1).
Таблица 1.
Применение ИФА в клинической практике
| Методы, предназначенные для обнаружения антигена |
Методы, предназначенные для выявления антител |
- Ранняя диагностика вирусных инфекций
- Этиологический анализ эпизоотии и изучение закономерности эпизоотического процесса
- Количественная оценка вирусных антигенов при изготовлении вакцинных и диагностических препаратов
|
- Эпизоотологический мониторинг инфекций
- Ретроспективная диагностика болезни
- Оценка напряженности иммунитета и иммунологической эффективности применяемых в хозяйстве вакцин
- Определение уровня колостральных антител у молодняка в первые дни (недели) жизни
- Оценка качества терапевтических препаратов
- Изучение механизмов формирования иммунитета и роли различных факторов иммунной системы в патогенезе инфекционных болезней
|
Нашими специалистами в сотрудничестве с ведущими отечественными и зарубежными учеными проводятся исследования направленные на разработку и внедрение в широкую ветеринарную практику иммуноферментных тест-систем, предназначенных для иммунодиагностики этиологически и экономически значимых инфекционных болезней различных видов животных, в том числе свиней.
В настоящее время ряд коммерчески доступных ИФА-наборов для свиноводства выпускается на регулярной основе (табл.2.).
Таблица 2.
ИФА-наборы, применяемые в свиноводстве в настоящее время
| Возбудитель/ ™ набора |
Метод определения |
Назначение метода |
Исследуемый биологический материал |
Вирус КЧС
(КЧС-Серотест)
|
Конкурентный ИФА |
Обнаружение вирус-специфических антител |
Сыворотка крови |
Вирус РРСС
(РРСС-Серотест)
|
Непрямой ИФА |
Обнаружение вирус-специфических антител |
Сыворотка крови |
Вирус ТГС
Ротавирус |
«Сэндвич» ИФА |
Обнаружение вирусного антигена |
Пробы фекалий |
Все ИФА-наборы прошли широкомасштабные испытания в различных свиноводческих хозяйствах и регионах нашей страны. Наборы укомплектованы готовыми к применению стандартизированными реагентами, достаточно просты в применении и доступны для всех региональных ветеринарных лабораторий.
Основные технологические приемы, используемые при разработке тест-систем и производстве ИФА-наборов, значительно повышающие их эффективность:
- Использование моноклональных антител
- Использование рекомбинантных антигенов
- Использование высокочувствительной ферментативной метки и очищенного конъюгата
- Использование стандартизованных микропанелей и химических реагентов, включая субстрат
Основные характеристики наших тест-систем и ИФА-наборов:
- Специфичность
- Чувствительность
- Воспроизводимость результатов
- Минимальное время проведения анализа
- Возможность автоматизированной обработки результатов и создания баз данных
- Комплектация наборов стандартизованными и готовыми к применению компонентами
- Длительный срок годности наборов (при соблюдении условий хранения)
- Простота применения, автоматизированный учет и интерпретация результатов существенно расширяет возможности для распространения и использования данных ИФА наборов в процессе проведения как массовых, так и единичных диагностических исследовани
В настоящее время в нашем отделе разрабатывается несколько диагностических иммуноферментных тест-систем, предназначенных для выявления антител к ряду возбудителей вирусных заболеваний свиней.
Новые ИФА-разработки НПО НАРВАК с использованием рекомбинантных антигенов и/или моноклональных антител
В стадии утверждения нормативной документации
 ИФА-набор для выявления антител к цирковирусу свиней второго типа (Цир-ко-Серотест)
В завершающей стадии лабораторных испытаний
ИФА для выявления антител к вирусу ТГС
В стадии разработки
ИФА для выявления антител к парвовирусу свиней
ИФА для выявления антител к gE-антигену вируса болезни Ауески
Предложения НПО НАРВАК свиноводческим хозяйствам
и ветеринарным лабораториям в области иммуноферментной диагностики:
- Поставка готовых ИФА-наборов.
- Проведение комплексных исследований сывороток крови по определению антител к вирусам КЧС, РРСС, ЦВС-2, ТГС и парвовирусу свиней. Обследование животных на наличие антигенов ВТГС и РВС. (Во всех случаях при необходимости проводятся дополнительные исследования методом ПЦР и традиционными диагностическими метода-ми).
- Обучение специалистов ветеринарных лабораторий методам ИФА.
- Консультационные услуги.
- Помощь в оснащении лабораторий современным оборудованием для ИФА
|
