ТЕСТ-СИСТЕМА ПЦР ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСА КЛАССИЧЕСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ПЦР) В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ

С помощью данной тест-системы вирус классической чумы свиней (КЧС) может быть обнаружен в патматериале от больных и павших животных (кровь, селезенка, сердце, печень), а также в инфицированных культурах клеток.
Тест-система позволяет определять вирус в концентрации 10-100 ИД₅₀/мл.

Анализ по определению вируса классической чумы свиней включает выделение суммарной РНК, проведение реакции обратной транскрипции и амплификации специфического фрагмента методом ПЦР в реальном времени.

• набор для выделения РНК (набор 1);
• набор для выявления КЧС методом ПЦР в реальном времени (набор 2).

Тест-система рассчитана на проведение 50 анализов.

Время проведения анализа – от 4 до 5 часов.

Особенность полимеразной цепной реакции в реальном времени – возможность регистрации результата ПЦР в процессе реакции, в каждый момент времени.

Для выявления продуктов амплификации в режиме реального времени используют ДНК-зонд (короткий одноцепочечный фрагмент ДНК размером 25 нуклеотидов, синтезированный химическим путем), комплементарный внутреннему участку – фрагменту РНК вируса классической чумы свиней. К зонду присоединены два химических соединения или две молекулы: флуоресцентная метка и гаситель флуоресценции. В ходе ПЦР происходит разрушение зонда, разъединение флуоресцентной метки и гасителя, что приводит к появлению свечения. Регистрируя интенсивность свечения, исследователь может узнать о ходе реакции без дополнительной стадии – электрофореза.

Существенным преимуществом является то, что регистрация флуоресценции происходит в закрытой пробирке, т.е. полностью исключается контаминация продуктами ПЦР.

Тест-система позволяет дифференцировать вирус классической чумы свиней (КЧС) от других пестивирусов, в том числе и от вируса диареи КРС. Преимуществом тест-системы является возможность определять вирус в условиях поголовной вакцинации. Единственным условием остается использование тест-системы через две недели после вакцинации, после элиминации вакцинного вируса из крови животных.

Набор 2 хранят при температуре от −18 до −20°С, набор 1 – от 2 до 6°С.

12 месяцев.